發(fā)布時間：2024-05-28 瀏覽量：0
CAR-T細(xì)胞療法是一種特殊的免疫療法，通過遺傳修飾患者自身的T細(xì)胞，給T細(xì)胞安裝一個瞄準(zhǔn)鏡，經(jīng)過修飾的CAR-T細(xì)胞體外增殖后再輸注回患者體內(nèi)，形成一支殺傷性的細(xì)胞部隊，能夠特異性地攻擊腫瘤細(xì)胞。
雖然CAR - T細(xì)胞在治療B細(xì)胞惡性腫瘤中已顯示出成功的臨床應(yīng)用，但嚴(yán)重不良事件的發(fā)生是CAR - T細(xì)胞治療的一個重要限制，其中最受關(guān)注的不良反應(yīng)為細(xì)胞因子釋放綜合征(cytokine release syndrome，CRS)。CRS是指在免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞作用的過程中，大量釋放細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子又會引發(fā)進(jìn)一步的連鎖反應(yīng)。細(xì)胞因子釋放綜合征的輕度臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、疲勞、頭痛、關(guān)節(jié)痛、肌痛，嚴(yán)重者以低血壓、高熱為特征，進(jìn)一步加重可引起休克、血管滲漏、彌散性血管內(nèi)凝血和多器官功能障礙綜合征，最終危及生命。
那么是什么導(dǎo)致的CRS呢？研究表明，CD4+ CAR -T和CD8+ CAR -T細(xì)胞的比例是CRS相關(guān)的一項重要指標(biāo)，然而，目前尚不十分清楚CD4+ CAR T細(xì)胞和CD8+ CAR T細(xì)胞對于引起CRS產(chǎn)生的作用是否相同。近期，來自巴斯德研究所的Philippe Bousso團(tuán)隊通過研究發(fā)現(xiàn)， CRS的發(fā)生是主要由CD4+ CAR-T細(xì)胞介導(dǎo)的，而且在腫瘤負(fù)荷越高的情況下，CD4+ CAR T細(xì)胞介導(dǎo)的CRS反應(yīng)越嚴(yán)重。相關(guān)研究發(fā)表在Cell Reports Medicine上。
該團(tuán)隊使用免疫健全的小鼠構(gòu)建了Eμ-myc B細(xì)胞淋巴瘤小鼠模型。將小鼠分為純化的CD4+ CAR-T 治療組、純化的CD8+ CAR-T治療組和未治療組。結(jié)果顯示CD4+ CAR-T的輸注產(chǎn)生了明顯的毒性，治療第3天體溫急劇降低，體重下降，血清細(xì)胞因子和趨化因子普遍升高（圖3）。而且地塞米松和anti-IL-6的干預(yù)可以減輕體重的降低（圖4），這是臨床治療CRS的有效措施。而CD8+ CAR T的毒性表現(xiàn)則與對照組差別不大。說明CAR-T輸注后的毒性反應(yīng)主要是由CD4+T細(xì)胞引起的，而不是CD8+T。
圖3. CD4+CAR-T和CD8+CAR-T輸注后，小鼠體征和血清細(xì)胞因子及趨化因子的變化
圖 4. 地塞米松和anti-IL-6的干預(yù)可以減輕CD4+CAR-T回輸后導(dǎo)致的體重降低。
接著，他們進(jìn)行了CD4/CD8固定比例混合細(xì)胞的輸注。發(fā)現(xiàn)CD4/CD8比例為9:1時輸注也產(chǎn)生了與CD4+ CAR T相近的毒性，而CD4/CD8為1:1時則與陰性對照無差異（圖5）。說明CRS的發(fā)生不止局限于CD4+CAR-T，還發(fā)生在CD4+CAR-T占較高比例的混合CAR-T細(xì)胞中。
圖 5. 輸注混合CAR-T細(xì)胞CD4/CD8比例為9:1時產(chǎn)生更高的毒性。
為了驗證CAR-T細(xì)胞 與CRS等級的相關(guān)性，作者分析了76名接受CD19CAR-T治療的DLBCL患者血液中總CD3+CAR-T、CD4+ CAR T和CD8+ CAR T的細(xì)胞絕對數(shù)量。與未發(fā)生CRS的患者相比，發(fā)生1~3級CRS的患者，在回輸后第7天的峰值前后，其外周血中total CD3+ CAR T、CD4+ CAR T和CD8+ CAR T細(xì)胞的絕對數(shù)都更高。但CD4+ CAR -T細(xì)胞的增加更為明顯(圖6)。經(jīng)歷CRS(1級、2級或3級)的患者比沒有經(jīng)歷CRS(0級)的患者血液中CD4+ CAR - T細(xì)胞平均多3.43倍，而CD8+ CAR - T細(xì)胞平均多1.73倍。總之，這些臨床觀察結(jié)果與CD4+ CAR - T細(xì)胞在CRS誘導(dǎo)中起主要作用的觀點一致。
圖6. 患者CAR-T回輸后第7天的峰值前后，外周血中total CD3+ CAR T、CD4+ CAR T和CD8+ CAR T細(xì)胞數(shù)。
另外，作者還發(fā)現(xiàn)在與未經(jīng)治療的小鼠相比，在高腫瘤負(fù)荷的情況下進(jìn)行CD4+CAR-T細(xì)胞治療更容易引發(fā)CRS，包括體溫下降、體重減輕、疾病評分高和過早死亡(圖7) ，低腫瘤負(fù)荷的CAR4 T細(xì)胞治療沒有引發(fā)可檢測到的毒性。這也暗示CD4+CAR-T細(xì)胞占優(yōu)勢加上高腫瘤負(fù)荷更容易導(dǎo)致CRS的發(fā)生。
圖7. 在高腫瘤負(fù)荷的情況下進(jìn)行CD4+CAR-T細(xì)胞治療更容易引發(fā)CRS
因此，針對患者的腫瘤負(fù)荷調(diào)整CD4:CD8 CAR - T細(xì)胞比例，為患者提供更加個性化的治療方案，可能更有助于減輕CAR - T細(xì)胞相關(guān)的毒性。
【注】文章內(nèi)容旨在科普細(xì)胞知識，進(jìn)行學(xué)術(shù)交流分享，了解行業(yè)前沿發(fā)展動態(tài)，不構(gòu)成任何應(yīng)用建議。
