發布時間：2022-10-25 瀏覽量：0
1、前言
抗N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受體腦炎是由針對神經元表面NMDA受體的自身免疫抗體引起的腦炎癥。自身免疫性腦炎（AE）的治療，包括抗NMDA受件腦炎，在難性病例中包括皮質類固醇和靜脈內免疫球蛋白（IVIGs）和或血漿交換，聯合使用其他免疫抑制劑。雖然大部分患者對這些治療的反映較好，但50%的患者仍然存在認知和行為問題，33%的患者持續癲癇發作，約2%的患者出現嚴重殘疾，對于抗NMDA受體腦炎患者來說，只有29%的患者實現了完全康復。
最近一項臨床研究表明，干細胞療法己經成為許多疾病的一種新的選擇。骨髓來源的單個核細胞和間充干細胞MSC輸注是安全的，可能改善各種神經疾病患者的臨床結果。自身免疫性腦炎也申請MSC應用治療，骨髓來源的MSC能夠抑制致病性T細胞和B細胞，防止脫髓鞘，增加軸突密度，在自身免疫性腦脊髓炎小鼠模型中保護少突膠質細胞不發生凋亡?！ ?/p>
Liem Nguyen Thanh項目組實驗結果證明，MSC治療后，小鼠病情緩解，存活率增加。在人類中，自體脂肪來源的間質血管組分改善了所有6例自身免疫性難治性癲癇患者的日?；顒?，并降低了3例的癲癇頻率。
Figure1.間充質干細胞在腦炎治療文獻
2、MSCs產品標準
MSCs產品檢測是多范圍的，通過安全性檢測、質量檢測、理化性質檢測。Liem Nguyen Thanh 項目組使用的MSCs在無異種蛋白和無血清培養條件下培養，不添加抗生素，并在第3代冷凍保存。治療前，MSCs復蘇培養至第6代。測定細胞數量、活力、MSC標記免疫表達、無菌性和內毒素水平。細胞治療產品的放行標準為:（1）不含細菌、真菌和支原體；（2）生存力≥90%；（3）UC-MSC質量檢測符合ISCT200613MSC的最低標準；（4）產品在給藥途徑內毒素限度內，即0.2EU/kg/h。細胞產品被運送到病房，在室溫下儲存，直到使用。
Figure2.MSC質量檢測圖
?。▓DA）免疫表型圖：第3代和第6代的細胞系均表達了高水平的MSC標記包括CD90、CD73和CD105，陰性標記為陰性包括CD45、CD34、CD19、CD11b和HLA-DR細胞。（圖B）倍增時間圖：從第2代到第6代的數量翻倍時間相當，表明它們處于活躍的增殖狀態。種群加倍時間從17.53±1.43H到22.17±0.55H不等。（圖C）菌落圖：P3代時，UC-MSCs平均每1000細胞形成462.96±139.81個菌落，P3代時平均每1000細胞形成342.59±16.04個菌落。該細胞系的CFU數與29個經傳代UC-MSC樣品相似。（圖D）三細分化圖：將UC-MSCs分化為成骨、成脂和成軟骨系，并分別與茜素紅S、油紅O和阿利新藍孵育，以檢測鈣沉積、脂滴和蛋白多糖結果顯示該細胞系具有MSC分化成脂、成骨、成軟骨的能力。（圖E）免疫抑制圖：MSC與PBMC共培養72H，該細胞能夠抑制來自健康供體的T細胞的增殖。（圖F）核型圖：UC-MSCs顯示正常核型。
Table1.UC-MSCs細胞治療產品
3、MSCs的治療抗NMDA受體腦炎第一例報告
NMDA受體腦炎是由患者免疫反應改變引起的。通過臨床治療，Liem Nguyen Thanh項目組報道了UC-MSCs的治療一名5歲女童被診斷為NMDA受體腦炎，并接受免疫抑制藥物和靜脈注射免疫球蛋白（IVIG）治療。盡管強化治療，患者病情惡化，因此選擇UC-MSCs治療。在細胞治療之前，她是永久性植物人患有彌漫性腦萎縮。三次UC-MSCs輸注后，患者接受德國昏迷恢復量表(CRS)、大運動功能分類系統(GMFCS)、大運動功能測量-88（gmmf-88）、手工能力分類系統（MACS）、改良阿什沃思量表(Modified Ashworth Scale)和Denver II試驗檢查，患者的認知和運動功能逐步改善。探訪時，她已經能走路、寫字和數數了。小便功能完全恢復。腦磁共振成像（MRI）顯示腦萎縮減輕。總的來說UC-MSCs對治療腦炎具有良好的效果。
Table2.德國昏迷緩解量表
Table3.運動功能的改變表
Table4.DenverII檢測表
Figure3.患者治療前和三次UC-MSC輸注后的MRI圖像
(A)第一次移植前MRI顯示彌漫性腦萎縮，第三腦室和雙側腦室擴張。(B)在三次UC-MSC注射后，觀察到側腦室、蛛網膜下腔和溝輕度擴張，改善了大腦MRI圖像。MRI：磁共振成像；UC-MSC：臍帶來源間充質干細胞/間質細胞。
4、MSCs臨床研究表明
1、UC-MSCs能夠抑制T細胞增殖,三次UC-MSC輸注后腦萎縮明顯減輕?！?/p>
2、UC-MSCs容易在培養中獲得和擴增優勢此外，由于它們的免疫原性低，免疫調節能力強，是異體使用的理想選擇?！ ?/p>
3、UC-MSCs通過分泌前列腺素E2、吲哚胺2,3-雙加氧酶、白細胞介素-10、白細胞介素-4、TGF-β、TNF-刺激的基因6蛋白等多種細胞因子，抑制B細胞、NK細胞增殖，促進巨噬細胞抗炎。
4、UC-MSCs還可以通過旁分泌的方式保護和再生神經細胞，它們釋放許多促血管生成和神經營養因子。
參考文獻：
[1] Liem Nguyen Thanh, Van T. Hoang, Huong Le Thu, Phuong Anh Thi Nguyen, Duc M. Hoang, Doan Van Ngo, Hung Cao Vu, Van Nguyen Thi Bich, Michael Heke. Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells for Severe Neurological Sequelae due to Anti-N-Methyl-d-Aspartate Receptor Encephalitis: First Case ReportCell Transplant. Cell Transplant. 2022 Jan-Dec; 31:09636897221110876.